项目介绍
激光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscope,CLSM)是近代最先进的细胞生物医学分析仪器之一。它是在荧光显微镜成像的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激光荧光探针,利用计算机进行图像处理,不仅可观察固定的细胞、组织切片,还可对活细胞的结构、分子、离子进行实时动态地观察和检测。激光扫描共聚焦显微技术已用于细胞形态定位、立体结构重组、动态变化过程等研究,并提供定量荧光测定、定量图像分析等实用研究手段,结合其他相关生物技术,在形态学、生理学、免疫学、遗传学等分子细胞生物学领域得到广泛应用。
样品要求
生物样品:
1、请先在荧光显微镜下观察荧光表达是否正常,以确定是否有必要使用激光共聚焦;
2、盖玻片厚度要求≤0.17mm;
3、明确激发波长和发射波长;
4、重构的需要明确扫描区域大小,位置,Z步进,这些参数会影响测试时间;
5、共聚焦要的标本一定要贴壁很好,不能悬浮起来,需要自己在载玻片上固定好后送样测试;
6、做显微成像,样品需要加抗荧光淬灭剂,盖玻片需要固定。
材料样品:
1、主要测试偏材料的样品,样品提前制备好,如果有需要请提前联系是否可以帮忙制样;
2、拍出来最大面积为1.11x1.8mm到5x5mm范围内,颜色可调。最大面积需要多张图拼接而成,若需要最大面积,则需多次拍摄;
3、尺寸没有要求,平整就行;
4、一般白光拍摄材料样品,只提供2-3张图片,若需更多图片,请提前协商。
仪器参数
1、多光子激光器,MaiTai DeepZ,激发波长690-1040nm
2、单光子激光器:激发波长(nm):405、458、476、488、496、514、561、633
3、检测通道数:该仪器设置有三个荧光通道,一个透射通道
4、检测波长范围:400-800nm
5、倒置荧光显微镜:以金属卤素灯为光源,配套有不同倍率的APO油镜(APO 100×/1.4、APO 63×/1.4、APO 40×/1.32、APO 25×/0.75,APO 16×0.5)、干镜(APO 10×/0.4,APO 20×/0.7)和水镜(APO 25×/0.95)
6、最高扫描分辨率8096×8096
7、扫描频率:7幅/秒
8、CO2温控微型装置
9、双通道FLIM荧光寿命检测装置
样品测试效果图


